染色體畸變測試程序是怎樣的

　　染色體畸變測試程序如下：

　　1.染色體畸變測試可以在原代人外周血淋巴細(xì)胞(HPBL)或已建立的細(xì)胞系中進(jìn)行，例如中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞。

　　2.在存在和不存在代謝活化(S9)的情況下，將培養(yǎng)物與幾種濃度的測試化合物一起培養(yǎng)3到4小時，并在不存在S9的情況下培養(yǎng)21小時。

　　3.陽性結(jié)果的特征是異常細(xì)胞在統(tǒng)計上顯著的、劑量依賴性的增加，超過了歷史的陰性對照限制。

　　染色體畸變試驗操作方法：

　　受試物處理：在有和無代謝活化系統(tǒng)條件下，以受試物染毒處于增殖期的細(xì)胞。淋巴細(xì)胞應(yīng)在有絲分裂刺激后的48h開始染毒。一般對每個濃度和陰性/溶劑對照應(yīng)該用雙份平行培養(yǎng)物。當(dāng)本底資料可以證明雙份平行培養(yǎng)物之間變異較小時，對每個濃度改用1個培養(yǎng)物也可以接受。氣態(tài)或揮發(fā)性物質(zhì)應(yīng)以適當(dāng)?shù)姆椒ㄔ囼灒缬妹荛]的培養(yǎng)瓶。

收獲時間：

　　在一次試驗，細(xì)胞應(yīng)在有和無代活化條件下染毒3~6h,并在染毒開始后約1.5倍的正常細(xì)胞周期時采樣。如此方案在有或無代謝活化時均為陰性結(jié)果，應(yīng)再進(jìn)行一次無代謝活化的試驗，適當(dāng)延長染毒時間。某些化學(xué)物在染毒/采樣時間長于1.5倍正常細(xì)胞周期時更易檢測。在有代謝活化條件下得到陰性結(jié)果，需要根據(jù)情況予以證實。如認(rèn)為陰性結(jié)果不必進(jìn)行證實，應(yīng)提供適當(dāng)理由。

　　染色體制備：在收獲前以秋水仙素或秋水仙胺處理細(xì)胞培養(yǎng)物1~3h。各個細(xì)胞培養(yǎng)物分別收獲和低滲、固定和染色，以制備染色體。